安捷倫氣相色譜儀研究大黃魚(yú)中多種殘留農藥

1試驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent-7890B氣相色譜儀（美國Agilent 公司），配有電子捕獲檢測器（μECD）和火焰光度檢測器（FPD）； 色譜柱：D B-17M S 毛細管柱，30m ×250μm ×0.25μm（美國J& W 公司）；離心機；旋渦混合器（德國IK A 公司）；恒溫氣浴振蕩搖床（德國IK A 公司）；固相萃取裝置（美國SU PELCO 公司）；氮吹濃縮儀；ENVI-18 固相萃取小柱（美國SU PELCO公司）。

標準溶液：由中國農業(yè)部環(huán)境保護科研監測所研制（濃度均為l00 μg/m L）；所用溶劑中除乙酸乙酯、正己烷為色譜純外，其余為分析純，其中中性氧化鋁填料于使用前400℃烘烤2 h，降溫后備用，無(wú)水疏酸鈉于使用前需650℃烘烤4 h，降溫后保存在干燥器內備用；水為三重過(guò)濾去離子水。

1.2 實(shí)驗方法

1.2.1 提取方法。

稱(chēng)取10 g 試樣置于50 m L 離心管中，加入4 m L 水，加入4 g 氯化鈉，接著(zhù)加入8 m L乙腈溶液，旋渦混合１m in，放在恒溫氣浴振蕩搖床上振蕩15 m in，4500 r/m in 離心5 m in，上清液按1.2.2 方法進(jìn)行凈化，殘渣中再加入5 m L 乙腈溶液提取一次，上清液也按1.2.2 方法進(jìn)行凈化。

1.2.2 凈化方法。

在EN V I-18 固相萃取柱上端依次填入約5 m m 高的中性氧化鋁填料，再填入約5 m m高的無(wú)水硫酸鈉，用4 m L 乙腈預淋洗柱子，棄去流出液，然后將上述1.2.1 的上清液慢慢轉移至柱中，收集全部流出液于15 m L 離心管中，于40℃下氮吹至近干，zui后準確移取1 m L 乙酸乙酯－正己烷（體積比1:1，色譜純）定容洗脫，過(guò)膜，裝入進(jìn)樣瓶，分別供G C-μECD 和G C-FPD 分析。

1.2.3 儀器參數與測定條件

1.2.3.1 有機磷類(lèi)農藥（以下簡(jiǎn)稱(chēng)第Ⅰ組），用G C-FPD 來(lái)測定。色譜柱：D B-17M S 石英毛細管柱，30 m×250μm×0.25μm ；柱升溫程序：100 ℃保持1 m in，以10 ℃/m in 升至120 ℃，再以15 ℃/m in 升至190 ℃，然后以6℃/m in 升至230 ℃，zui后以30℃/m in 升至290 ℃保持7 m in；進(jìn)樣口溫度：240 ℃；檢測器（FPD）溫度：240 ℃；氫氣：75 m L/m in；空氣：100 m L/m in；載氣：氮氣，純度大于等于99.99% ，流量50 m L/m in；進(jìn)樣量：2 μL。在上述色譜條件下農藥標準品、大黃魚(yú)樣品以及樣品添加混合標準溶液的色譜見(jiàn)圖1。

1.2.3.2 有機氯和擬除蟲(chóng)菊酯農藥（以下簡(jiǎn)稱(chēng)第Ⅱ組），用G C-μECD 來(lái)測定。色譜柱：D B-17M S 石英毛細管柱，30 m×250 μm ×0.25 μm ；柱升溫程序：80 ℃保持1 m in，以20 ℃/m in 升至240 ℃保持3 m in，再以10 ℃/m in 升至260 ℃保持4 m in，zui后以10 ℃/m in 升至290 ℃保持9 m in；進(jìn)樣口溫度：240 ℃；檢測器（μECD）溫度：310 ℃；載氣：氮氣，純度大于等于99.99% ，流量50 m L/m in；進(jìn)樣量：2μL。在上述色譜條件下農藥標準品、大黃魚(yú)樣品以及樣品添加混合標準溶液的色譜見(jiàn)圖2。

2 安捷倫氣相色譜儀研究大黃魚(yú)中多種殘留農藥結果與分析

2.1 樣品前處理條件的選擇

2.1.1 提取。

對于動(dòng)物源性食品中的農藥殘留，一般認為用脂溶性溶劑將油脂一起提取出來(lái)，提取效率比較高，但該方法會(huì )同時(shí)帶出大量雜質(zhì)，給凈化帶來(lái)困難。乙腈作為一種通用的提取溶劑在藥物殘留檢測方面得到了廣泛的運用，乙腈對大多數農藥均有較好的溶解度且脂肪在乙腈中的溶解度較小，而且乙腈與凈化時(shí)的固相萃取柱相相匹配，無(wú)需濃縮可直接過(guò)柱，因此本研究考慮使用乙腈作為提取溶劑。但由于單純使用乙腈提取時(shí)，魚(yú)肉會(huì )凝結在一起不利于有機溶劑在水產(chǎn)品組織中的滲透提取。實(shí)驗發(fā)現加入4 m L 水，可以增加乙腈對肌肉的滲透性，魚(yú)肉組織得到*分散，有利于提高提取效率，而同時(shí)加入氯化鈉使蛋白質(zhì)與氯化鈉相互作用，從而肌肉組織呈稀泥狀，整個(gè)提取體系狀態(tài)非常均一，利用氯化鈉的鹽析作用，高速離心使水相和有機相分離，以除去水和水溶性雜質(zhì)，同時(shí)還可減少提取液中的干擾基質(zhì)含量并提高待測物在乙腈相中的分配比。離心后的溶液偶有乳化現象，可振搖幾下再離心，即可消除乳化。

2.1.2 凈化。

Envi-18 柱的硅膠上接有十八烷基，有較高的相覆蓋率和碳含量，對非極性物質(zhì)有較高的容量，Envi-18 柱配合乙腈作為正相柱使用，同時(shí)結合中性氧化鋁一起作用，對油脂的去除有十分顯著(zhù)的效果，同時(shí)還可以除去大部分弱極性的雜質(zhì)。在柱上裝入無(wú)水硫酸鈉，預先除去提取液中殘余的極少量水分。提取液過(guò)柱后呈無(wú)色透明，凈化效果良好，且對多種有機氯、擬除蟲(chóng)菊酯、有機磷三種不同類(lèi)型的農藥均有滿(mǎn)意的回收率。而且本方法的提取液不必濃縮，可直接過(guò)柱，操作簡(jiǎn)便。

2.2 方法的線(xiàn)性范圍、定量下限、回收率和精密度

根據14 種農藥在氣相色譜儀中的響應值和各進(jìn)出口國*，確定各種農藥在混合標準儲備液中的濃度，其中α- 硫丹、β- 硫丹、硫丹硫酸鹽0.005 μg/m L，其余11 種農藥均為0.05 μg/m L。再由混合標準儲備液稀釋成5 個(gè)不同濃度的混合標樣，用氣相色譜進(jìn)行分析，以峰面積對質(zhì)量濃度做線(xiàn)性回歸分析，線(xiàn)性方程和相關(guān)系數見(jiàn)表1 和表2。用本方法對大黃魚(yú)添加水平為0.001~0.01 m g/kg 的標準品進(jìn)行平行6 次實(shí)驗，其中α 硫丹、β 硫丹、硫丹硫酸鹽的定量下限（S/N≥10）為0.001 m g/kg，其余各項目的定量下限均小于0.01 m g/kg。方法平均回收率為63% ～110% ，相對標準偏差為4.1% ～10.5% ，結果較為理想。

3安捷倫氣相色譜儀研究大黃魚(yú)中多種殘留農藥結論

本文以脂肪含量較高的大黃魚(yú)為研究對象，建立了用一種前處理方法同時(shí)檢測大黃魚(yú)中多種有機氯、擬除蟲(chóng)菊酯和有機磷類(lèi)農藥殘留量的分析方法。該方法的步驟簡(jiǎn)單、試劑用量少、效果良好，方法回收率及精密度均符合殘留分析要求，適合于監控大黃魚(yú)中的多種農藥殘留。通過(guò)喂養的方式給藥，分析農藥在魚(yú)體內代謝和殘留情況，這有待于今后進(jìn)一步實(shí)驗研究。